ICSI - Intracytoplasmic Sperm Injection

generalitet

ICSI (intracytoplasmisk sperminjeksjon) er en medisinsk assistert forplantningsteknologi (PMA) -teknikk som innebærer inseminering av en oocyt ved mikroinjeksjon av en enkelt sperm direkte inn i den.

I denne praksisen møtes gametene (oocyt og spermatozon) utenfor kvinnens kropp, slik at befruktning og dannelse av ett eller flere embryoer foregår "i et reagensrør" (nærmere bestemt på en kulturplate), i stedet for alle inne i fallopian tube av pasienten.

Deretter overføres embryoene til livmor hvor implantatet finner sted, noe som kan resultere i graviditet.

ICSI-metoden innebærer generelt farmakologisk stimulering av eggstokken for å produsere flere oocytter, etterfulgt av kirurgisk fjerning av det samme (dette er et lite inngrep kalt pickup ); Samlingen av mannlige gameter kan i stedet utføres av onanering, perkutant eller testikulær biopsi.

I laboratoriet blir de kvinnelige gametene plassert på kulturplater inne i inkubatorene, så de individuelle spermatozoa inokuleres med en mikropipett direkte inn i oocyt cytoplasma.

Hvis oocytene vellykkes befruktes, overføres embryoene til livmoren ved transvaginal, ultralydstyrt eller hysteroskopisk behandling, innen 48-72 timer.

Tilgang til ICSI forventes først etter at PMA senterlegen har utelukket muligheten for naturlig oppfattelse. Denne teknikken er spesielt indikert i tilfeller der alvorlig mannlig infertilitet er tilstede; Faktisk gjør ICSI det mulig å overvinne vanskeligheter med befruktning, siden en enkelt spermatosone settes direkte inn i oocyt cytoplasma.

Innledende notater

Medisinsk assistert fremplantning (PMA) hjelper par som ønsker å få barn, men kan ikke spontant gjennomføre en graviditet. Dette alternativet indikeres av leger som en del av en behandlingsvei, i tilfeller der infertilitet hos minst en av de to partnerene er funnet, og det finnes ingen andre effektive terapeutiske metoder for å løse denne tilstanden.
Verdens helseorganisasjon (WHO) definerer infertilitet som "unnlatelse av å bli gravid i et par etter 12-24 måneder med ubeskyttede målrettede relasjoner " (det vil si i dagene med sannsynlig eggløsning).
Assistert befruktning bruker ulike enkle eller komplekse teknikker, som involverer manipulering av kvinnelige gameter (oocytter), mannlige (spermatozoer) eller embryoer. Første nivå metoder inkluderer hormonell stimulering, ultralyd overvåking av kvinners eggløsning og intrauterin insemination (IUI); sistnevnte er preget av det faktum at befruktning foregår direkte i det kvinnelige kjønnsapparatet. Andre og tredje nivåets komplekse behandlinger krever derimot at befruktning først finner sted in vitro og inkluderer: IVF (in vitro befruktning med embryooverføring), ICSI og GIFT (intratubarial overføring av gameter). Disse prosedyrene er indikert når ufruktbarhet som skal behandles er alvorlig og krever mer invasive metoder som krever lokalbedøvelse og / eller dyp sedasjon.

indikasjoner

Årsakene som kan bestemme infertilitet er mange og kan avhenge av bare en eller begge partnere.

Vanligvis anbefales ICSI-teknikken i tilfeller av:

Tubalfaktorer : Fallopierørene (de to kanalene som knytter eggstokkene til livmoren) kan være blokkert eller skadet av ulike årsaker; dette hindrer unnfangelsen (det er møtet med det seminalvæske med eggcellen) eller nedstigningen av det befruktede egget i uterus for implantatet. Tubal lesjoner er ofte avhengige av forsømte seksuelle infeksjoner (som for eksempel klamydia), men kan også stamme fra medfødte sykdommer, bekkenkirurgi eller tidligere ektopisk graviditet .
Mannlig ufruktbarhet av alvorlig karakter : Det kan skyldes ulike forhold som kompromitterer produksjonen eller kvaliteten på det seminalvæske, som varicocele (spredning av varicose av vene i pungen), kryptorchidisme (feil eller ufullstendig nedstigning av testiklene i pungen) og hormonelle underskudd (f.eks. hypogonadotropisk hypogonadisme). Andre årsaker kan inkludere: kroniske infeksjoner som forårsaker unormal seminalvæske eller forårsaker delvis eller totalt lukning av vasdeferensene, genetiske abnormiteter og immunologiske faktorer (produksjon av anti-sperminantistoffer av mannlig organisme eller partner).
Manglende terapeutisk prosedyre av førstegangsteknikker, dvs. når medisinsk kirurgisk behandling eller intrauterin inseminasjoner ikke har gitt resultater;
Ubesvarte eller redusert befruktning i tidligere IVF- sykluser (IVF).

Andre forhold som gjør ICSI nødvendige inkluderer:

Uforklarlig sterilitet (det vil si, du kan ikke fastslå en fastslått årsak), hvis den forrige behandlingen (f.eks. Inseminasjonssykluser) ikke har gitt resultater eller er dømt upassende;
Obstruktiv azoospermi (fravær av spermatozoer i sædvæsken, på grunn av hindringer som forhindrer utslipp med utløsning) og sekresjon (mangel på spermaproduksjon i testiklene);
Redusert eggstokkreserve : Lavt antall oocytter i eggstokkene på grunn av fremveksten av kvinnens alder eller på grunn av medfødte eller kirurgiske årsaker;
Endokrine-ovulatorisk infertilitet : eggstokkene produserer ikke oocytter på grunn av årsaker til hormonell opprinnelse;
Endometriose : Unormal vekst av vev som ligner det som normalt dekker uterusens indre (endometrium) på andre steder; denne tilstanden kan forårsake infertilitet da det ofte produserer adhesjoner til eggstokkene eller egglederne.
Faktorer av infertilitet både mann og kvinne : det er samtidig flere årsaker som påvirker unnfangelsen.

Foreløpige medisinske undersøkelser

Når et par unnlater å vokse til tross for målrettet samleie, over en periode på 12-24 måneder, kan medisinske undersøkelser angis for å verifisere infertilitet hos minst en av partnerne.

Først og fremst møter legen de to pasientene og utarbeider en medisinsk historie basert på deres medisinske historie, og fastslår om det er faktorer som påvirker fruktbarheten (f.eks. Seksuelle infeksjoner, overdreven fedme eller tynnhet, antitumorbehandling, røyking, alkoholmisbruk). etc.) og anbefaler den mest hensiktsmessige terapeutiske prosedyren for å løse det reproduktive problemet.

Hvis forholdene som oppstår ikke kan håndteres med andre tilstrekkelige farmakologiske og / eller kirurgiske inngrep, så hvis forplantning er umulig eller i alle fall sannsynligheten for å starte en graviditet er fjernt (som i tilfelle for eksempel av rør som ikke er synlige eller skadede, sperm med underskudd verdier mv.), legene indikerer bruk av medisinsk assistert fremplantning. Prosedyren som er vedtatt, velges vanligvis basert på infertilitetsårsaken som paret presenterer.

Diagnostisk vei for å fastslå infertilitet

Avhengig av parets profil, kan PMA senter spesialist anbefale spesifikke tester for å utelukke tilstedeværelse av hormonelle dysfunksjoner, patologier som påvirker livmor og rør, unormaliteter av sædvæsken og så videre.

For paret

Hormonal dosering (vi vurderer nivåene av kjønnshormoner tilstede i blodet, for å utelukke dysfunksjoner);
Genetiske undersøkelser (for å vurdere mulige anomalier);
Immunologiske tester for tilstedeværelse av anti-sperm antistoffer.

For mannen

Spermiogramma (undersøkelse av sædvæsken for å vurdere sin befruktningskapasitet og andre grunnleggende funksjoner, som antall, morfologi og prosentandel av motile spermatozoa);
Spermiokultur ( spermanalyse for å vurdere tilstedeværelsen av smittsomme stoffer i kjønnsorganene).

For kvinnen

Hysterosalpingografi (for å kontrollere rørets tilstand og deres patency);
Ultralyd av livmor og eggstokkene (det gjør det mulig å kontrollere eggløsning, mengden av oocytter, tilstedeværelsen av mulige cyster, fibroider eller andre formasjoner);
Hysteroskopi (endoskopisk undersøkelse av livmorhulen);
Pap test (cytologisk undersøkelse som undersøker tilstedeværelsen av en HPV lesjon og endringer av cellene på nivået av livmorhalsen);
Søk etter smittsomme stoffer (f.eks. Vaginal swab for påvisning av vanlige patogener som Chlamydia og Candida ).

Hvordan er det gjort?

ICSI-metoden brukes sammen med IVF, med den forskjellen at fertiliseringsmetoden til oocyten foregår ved injeksjon av en enkelt spermatozon i cytoplasma.

Også i dette tilfellet finner møtet av gametene sted utenfor kvinnens kropp (dvs. på en kulturplate). Etter den vellykkede befruktningen overføres embryoene til livmoren.

Innhenting av oocytter

ICSI kan utføres:

I en spontan syklus (derfor uten ovarie stimuleringsbehandling);
Med farmakologisk stimulering av eggløsning for å få flere oocytter til å modne, dvs. med induksjon av follikulær vekst med samtidig produksjon av flere kvinnelige gameter ved administrering av legemidler (daglige doseringer).

I sistnevnte tilfelle kontrolleres ovariesvaret ved:

Ultralyd overvåkning : En rekke ultralydsskannelser utføres, omtrent hver annen dag, for å observere veksten av follikler, hvorfra oocytene vil utlede;
Hormonal dosering : Blodprøver tas for å vurdere sekresjonen av hormoner forbundet med veksten av follikler i eggstokken.

Kirurgisk prøvetaking av oocytter produsert og oppsamling av sæd

Etter å ha stimulert eggstokken til å produsere flere follikler, utføres oocyt samling (pick-up) med en transvaginal prosedyre, under lokalbedøvelse og / eller dyp sedasjon. Under ultralydskontroll er folliklene "poeng" med en nål og egget suges inn i dem. I ICSI-teknikken varer punkterings- og aspirasjonsprosedyren i gjennomsnitt fra 5 til 15 minutter, avhengig av antall follikler som er til stede.

Sperm er samlet av onanering etter 2-3 dager med avlivningsavhengighet, samme dag som egginnhenting. I noen tilfeller utføres samlingen av mannlige gameter perkutant eller testikulær biopsi.

Gjødsel av de oppsamlede oocytene foregår samme dag for innsamling.

Gjødsel av oocytter i laboratoriet

Den follikulære væsken analyseres under et mikroskop for å isolere oocytene, som overføres til en spesiell kulturvæske og lagres i en inkubator. Samtidig fremstilles sædprøven, med valg av mobil og vitale spermatozoa.

Fortsett deretter til unionen og ekstrakorporeal dyrking av gameter. ICSI-teknikken er basert på et prinsipp for "imitasjon" av befruktningsprosessen, ved manipulering under mikroskopisk veiledning: oocytten holdes på plass med en glasspipett og ved hjelp av en nålkanyl injiseres i cytoplasma en enkelt spermatozon.

Produktet av denne operasjonen er plassert på spesialplater med kulturmedier som gir næring til cellene, innvendig inkubatorer. Denne fasen er veldig delikat og foregår under streng kontroll av biologer og embryologer, som overvåker alle prosesser av celledeling som vil føre til dannelsen av embryoet.

Når det gjelder IVF, 16-18 timer etter inseminering, forekommer befruktning, dvs. dannelsen av zygoten, hvor de to pronucleiene (mann og kvinne) kan observeres.

Embryo utvikling og overføring til livmor

Etter 48-72 timer velges 1 til 3 embryoer og overføres til livmor. Prøven blir introdusert i et tynt plastkateter og kanalisert av gynekologen til livmorutgangen. Innføringen av embryoer varer bare noen få minutter og er generelt smertefri.

nedfrysing

Innenfor rammene av gjeldende forskrifter fryses de ikke overførte embryoene i flytende nitrogen, derfor lagres de i prøvebanken. ICSI-teknikken kan faktisk forutsi bruk av gameter eller nyfødte embryoer (" ferske sykluser ") eller kryokonserves, som bringes og opprettholdes ved svært lave temperaturer (" opptiningssykluser ").

Hvis graviditeten ikke blir nådd ved første forsøk, kan de tidligere kryokonserverte embryoer eller oocytter brukes til senere behandlingssykluser.

Suksessrate

ICSI-teknikken er forbundet med en høy prosentdel av befruktning med embryodannelse (spermatozon blir spart fra å krysse pellucidmembranen) og har god suksess i nærvær av alvorlig mannlig infertilitet. I tilfelle av azoospermi, faktisk kan teknikken utføres ved bruk av gameter som er tilstede i testiklene eller i epididymis, hvorfra de tas ved aspirasjon eller mikrokirurgi (ligner en biopsi). Den eneste tilstanden som er nødvendig for ICSI-søknaden, er faktisk at spermatozoa er avgjørende.

Graviditeten suksessrate er også god (generelt sett er det anslått å være rundt 20% per syklus). Utfallet av behandlingen avhenger av kvaliteten på embryonene som overføres in vitro og på livmor kapasitet for å motta dem.

Risiko og mulige komplikasjoner

Reaksjonen på ulike terapeutiske protokoller for å indusere eggløsning må kontrolleres (med ultralydsskanning av eggstokkene og / eller hormonelle doser) for å unngå ovarial hyperstimuleringssyndrom, det vil si overdreven follikulær modning og eggproduksjon.
Denne tilstanden kan innebære forskjellige symptomer, for eksempel kortpustethet, kvalme og forstørrelse av eggstokkene, som er smertefulle, forårsaker ubehag i pasienten; i de mest alvorlige tilfeller kan abdominal distans og dannelse av blodpropper forekomme som kan gjøre sykehusinnleggelse nødvendig.
Peritoneale infeksjoner er en av de mulige konsekvensene av laparoskopiske prosedyrer assosiert med ICSI teknikken, rettet mot å finne eggceller.
Videre er det nødvendig å rapportere en større sannsynlighet for flere graviditeter, siden for å øke muligheten for å gi opphav til en forestilling, under ICSI-prosedyren, kan flere embryoer overføres inne i uterusen. En graviditet innebærer risiko for helsen til moren og barna, som er mer sannsynlig å bli født for tidlig og å være undervektig på slutten av svangerskapet.